Der Retikulozytenfarbstoff für Sysmex-Hämatologieanalysatoren bietet eine gezielte fluoreszierende Nukleinsäurefärbung für Halbleiterlaser-Durchflusszytometrieplattformen. Das flüssige Reagenz dringt in kernhaltige Blutzellen, Retikulozyten und Blutplättchen ein, um sich selektiv an intrazelluläre RNA und DNA zu binden und spezifische Nebenfluoreszenz- und Lichtstreusignale über bestimmte Detektionskanäle zu erzeugen. Die Lösung wurde für die direkte Integration in automatisierte Fluidsysteme entwickelt und gewährleistet eine stabile Fluoreszenzintensität, ein geringes Hintergrundrauschen und eine reproduzierbare Chargenleistung in klinischen Laborumgebungen.
Was sind hämatologische Färbe-/Farbstoffreagenzien?
Automatisierte hämatologische Farbstoffreagenzien sind flüssige Fluoreszenzmarker, die für durchflusszytometrische-basierte Zellanalyseplattformen entwickelt wurden. Im Gegensatz zu herkömmlichen manuellen Blutausstrichfärbungen, die in der Lichtmikroskopie verwendet werden, dringen diese flüssigen Farbstoffe durch kontrollierte Membranpermeabilisierung in die Zielzellen ein, um intrazelluläre Nukleinsäuren zu markieren. Unter Anregung eines Halbleiterlasers innerhalb der optischen Flusszelle emittieren die markierten Zellstrukturen seitliche Fluoreszenz- und Lichtstreusignale, wodurch die Systemoptik präzise zwei-dimensionale Streudiagramme und Zellclusterverteilungen erzeugen kann.
Rolle bei der Zellklassifizierung/-detektion
In der optischen Hämatologieanalyse ermöglichen Fluoreszenzfarbstoffe eine differenzielle Zellunterscheidung durch Quantifizierung der intrazellulären Nukleinsäuredichte:
Differenzierung der weißen Blutkörperchen:Trennt Lymphozyten, Monozyten, Neutrophile, Eosinophile und Basophile basierend auf dem RNA/DNA-Verhältnis und der zytoplasmatischen Struktur.
Identifizierung atypischer und unreifer Zellen:Identifiziert Blastenzellen und unreife Granulozyten anhand einer erhöhten Fluoreszenzemissionsintensität.
Retikulozytenzählung:Misst die restliche ribosomale RNA in jungen roten Blutkörperchen, um die erythropoetische Aktivität des Knochenmarks zu beurteilen.
Optische Thrombozytenzählung:Löst riesige Blutplättchen auf und unterscheidet Fragmente roter Blutkörperchen von Blutplättchen mithilfe der Ziel-Nukleinsäure-Fluoreszenz-Gating-Funktion.
Erkennungskanal
Der Fluoreszenzfarbstoff wirkt über bestimmte automatisierte optische Kanäle:
WNR-Kanal:Zählt weiße Blutkörperchen und isoliert kernhaltige rote Blutkörperchen durch differenzielle Nukleinsäurefärbung.
WDF-Kanal:Differenziert reife Leukozyten-Subpopulationen und erkennt unreife Granulozyten mithilfe von Seitenfluoreszenz- und Seitenstreuparametern.
WPC-Kanal:Screening auf Vorläuferzellen und abnormale Lymphozyten basierend auf der Kerndichte und der unterschiedlichen Membranpermeabilität.
RET-Kanal:Misst Retikulozytenfraktionen und optische Parameter der roten Blutkörperchen anhand der RNA-Fluoreszenzintensität.
PLT-Kanal:Markiert Thrombozyten-Nukleinsäuren, um Störungen durch mikrozytische Erythrozyten während der optischen Zählung zu verhindern.
Kompatible Analysatorserien
Entwickelt für die direkte betriebliche Abstimmung mit automatisierten Hämatologieplattformen unter Verwendung der Halbleiterlaser-Durchflusszytometrie:
XN-Serie:XN-1000, XN-2000, XN-3000, XN-9000, XN-L-Serie (XN-350, XN-450, XN-550)
XS-Serie:XS-500i, XS-800i, XS-1000i
XT-Serie:XT-1800i, XT-2000i, XT-4000i
XE-Serie:XE-2100, XE-5000
Produktspezifikationen
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Parameter |
Technische Spezifikation |
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Physische Form |
Flüssige Lösung, klar bis hellgelb |
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Anregungswellenlänge |
633 nm / 635 nm |
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Emissionswellenlänge |
650 nm – 670 nm |
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Zielbindung |
Ribonukleinsäure (RNA) und Desoxyribonukleinsäure (DNA) |
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Lot-bis-Lot-CV |
< 2.0% (SFL channel) |
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Partikelfiltration |
0,2 µm absolut membranfiltriert |
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pH-Bereich |
7,20 – 7,50 bei 25 Grad |
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Osmolalität |
280 – 320 mOsm/kg |
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Qualitätsstandard |
ISO 13485 / CE IVD-konform |
Anwendungs- und Reagenzienfunktion
WNR-Kanalfärbung (STAC-DYE-SYSWNR):Permeabilisiert Zellmembranen, um einen schnellen Zellkernfarbstoffeintritt zu ermöglichen und intakte NRBC-Kerne von weißen Blutkörperchen zu trennen, um eine präzise Erzeugung von NRBC-Prozent und Leukozytenzahl zu ermöglichen.
WDF-Kanalfärbung (STAC-DYE-SYSWDF):Färbt intrazelluläre Nukleinsäuren von Leukozyten, um unterschiedliche Scattergram-Cluster für Neutrophile, Lymphozyten, Monozyten und Eosinophile zu erzeugen.
WPC-Kanalfärbung (STAC-DYE-SYSWPC):Färbt selektiv Blastenzellen und abnormale Lymphozyten basierend auf der Lipidzusammensetzung und Kerndichte zur Markierung sekundärer Zellen.
RET-Kanalfärbung (STAC-DYE-SYSRET):Bindet an restliche RNA in unreifen roten Blutkörperchen und ermöglicht so die Berechnung des Gesamt-Retikulozyten-Prozentsatzes, der absoluten Anzahl und des Anteils unreifer Retikulozyten.
PLT-Kanalfärbung (STAC-DYE-SYSPLT):Markiert Thrombozyten-Nukleinsäuren, um mikrozytäre Erythrozyteninterferenzen bei optischen Thrombozytenmessungen mit geringer -Anzahl zu verhindern.
Verpackung / Lagerung
Verpackungskonfigurationen:
- Kartuschenkassetten: 2 × 12 ml
- Flaschenlösung: 1 × 50 ml, 1 × 100 ml, 1 × 500 ml
Lagertemperatur:2 bis 30 Grad (vor direktem Licht und Frost schützen)
Haltbarkeit im ungeöffneten Zustand:18 Monate
On-Board-Stabilität:60 Tage unter Laborumgebungsbedingungen
Verwandte Reagenzien für die Hämatologie
Verdünnungslösungen für die Hämatologie:Isotonische Pufferlösungen bewahren die Integrität des Zellvolumens und steuern die Flüssigkeitsleitfähigkeit während physikalischer Messungen.
Lysereagenzien für die Leukozytendifferenzierung:Aktive Lösungen, die selektiv rote Blutkörperchen lysieren, um weiße Blutkörperchen für die optische Analyse vorzubereiten.
Reinigungslösungen für Analysatoren:Enzymatische Waschflüssigkeiten zur Entfernung von Proteinablagerungen und Farbstoffrückständen aus internen Fluidleitungen und optischen Flusszellen.
Konzentrierte Hüllenflüssigkeiten:Hydrodynamische Flüssigkeiten, die so formuliert sind, dass Probenströme in optischen Detektionskammern zentriert werden.
FAQ
F: Wie verhindert dieser Farbstoff eine Signalüberlappung zwischen Retikulozyten und reifen roten Blutkörperchen?
A: Der Farbstoff zielt auf RNA-Stränge ab, die in Retikulozyten vorhanden sind. Reife rote Blutkörperchen enthalten keine funktionelle RNA oder DNA und emittieren bei Laseranregung keine Hintergrundfluoreszenz, was zu einer deutlichen Basislinientrennung auf optischen Streudiagrammen führt.
F: Wie hoch ist die Stabilität des Reagenzes in offenen Fläschchen, nachdem es in das Gerät geladen wurde?
A: Die flüssige Formulierung bleibt an Bord bis zu 60 Tage lang zwischen 2 und 30 Grad stabil. Stabilisierungsmittel verhindern Konzentrationsverschiebungen und sorgen für eine konstante Fluoreszenzemission während des gesamten Nutzungszyklus.
F: Sind bei der Einführung dieses Farbstoffreagenzes Hardware- oder Softwareanpassungen erforderlich?
A: Das Reagenz entspricht standardmäßigen physikalischen -chemischen Parametern, Anregungsreaktionskurven und Fluidviskosität und ermöglicht so den direkten Betrieb unter etablierten Systemkalibrierungsprotokollen.
F: Wie schützt die flüssige Formulierung optische Flusszellen vor Partikelansammlung?
A: Die Lösungen werden bei der Endverpackung durch 0,2-µm-Absolutmembranfilter verarbeitet. Die nicht-aggregierende Farbstoffstruktur verhindert die Bildung von Mikropartikeln und die Ansammlung von Rückständen in Fluidleitungen und Düsen.
F: Welche Dokumentation liegt den Chargenlieferungen zur Qualitätsüberprüfung bei?
A: Zu den Lieferungen gehören ein Analysezertifikat (CoA), ein Sicherheitsdatenblatt (SDB), Chargentestaufzeichnungen und eine ISO 13485-Konformitätsdokumentation.
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